DNA上樣緩沖液（6×）技術手冊

1. 產品概述

DNA 上樣緩沖液 (6× DNA Loading Buffer) 是一種用于常規(guī) DNA 電泳（瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠）的預混指示劑。本產品采用 6 倍濃縮設計，僅需微量添加即可為 DNA 樣本提供理想的電泳性能。

本產品包含高濃度的密度梯度劑（如甘油或 Ficoll）、雙色示蹤染料（溴酚藍與二甲苯青）以及金屬離子螯合劑 EDTA。它旨在確保 DNA 樣本能夠穩(wěn)定沉入加樣孔底，并提供兩條清晰的可見電泳前沿線，便于實驗人員實時監(jiān)控不同大小片段的遷移進度。

2. 作用機理

DNA 上樣緩沖液通過以下多種功能確保電泳實驗的成功：

• 增加密度： 組分中的高濃度密度試劑（甘油或 Ficoll 400）顯著增加了樣品的比重，使其能夠垂直沉入加樣孔底部，防止樣本飄散至電泳緩沖液中導致損失。

• 雙色示蹤：

• 二甲苯青 FF (Xylene Cyanol FF)： 在 1% 瓊脂糖凝膠中約位于 4000 bp 位置，用于示蹤大片段。

• 溴酚藍 (Bromophenol Blue)： 在 1% 瓊脂糖凝膠中約位于 400-500 bp 位置，用于示蹤小片段。

• 保護 DNA： 組分中的 EDTA 能夠有效螯合環(huán)境中的mg等二價陽離子，從而抑制依賴于這些離子的核酸內切酶活性，防止 DNA 在電泳過程中被降解。

  
  

• 維持 pH： Tris-HCl 緩沖體系確保樣品在進入凝膠初期維持穩(wěn)定的電中性或弱堿性環(huán)境。

  
  

3. 產品核心優(yōu)勢

• 高濃縮倍數： 6× 設計允許用戶添加更少量的緩沖液（僅占總體積的 1/6），從而提高上樣孔中實際 DNA 的負載量，增強微量條帶的可視性。

• 條帶清晰銳利： 采用高純度原料，不含核酸酶污染，有效消除條帶彌散或拖尾現象，確保成像結果背景潔凈。

• 指示前沿明確： 示蹤染料在紫外激發(fā)下不產生熒光背景，不干擾 DNA 與熒光染料（如 EB, GoldView, Sybr Green）的結合及觀察。

• 即開即用： 省去繁瑣的配稱步驟，顯著提高實驗效率，且批次間穩(wěn)定性高，數據重復性好。

• 穩(wěn)定性： 室溫下性質穩(wěn)定，4°C 可長期存放，不易發(fā)生沉淀或變質。

4. 廣泛的應用領域

• PCR 產物檢測： 快速鑒定 PCR 擴增片段的大小與特異性。

• 質粒 DNA 鑒定： 監(jiān)測質粒的酶切消化、構象分析（超螺旋/開環(huán)）。

• 基因組 DNA 分析： 觀察基因組 DNA 的完整性及其降解情況。

• DNA 膠回收： 在核酸回收過程中作為安全、清晰的追蹤指示。

5. 技術參數規(guī)格 (Specifications)

6. 使用說明

1. 比例： 按照 1:5 的比例將 6× DNA Loading Buffer 加入到 DNA 樣本中。例如：將 1 μL 緩沖液加入到 5 μL DNA 樣本中。

2. 混勻： 用加樣槍輕輕吹吸或輕輕微吸混勻。

3. 上樣： 直接加樣至電泳凝膠孔中。

4. 電泳： 根據凝膠濃度，觀察溴酚藍和二甲苯青的遷移位置，并在示蹤染料到達凝膠下沿前 1-2 cm 處停止電泳。

7. DNA上樣緩沖液（6×）質量承諾

我們對每一批次的 DNA 上樣緩沖液均進行嚴格的無核酸酶污染測試及實際電泳條帶遷移驗證。我們承諾：本產品無熒光背景干擾、遷移速度恒定、對 DNA 保護性強，能為您提供電泳視覺體驗和精準的數據支持。如有疑問，我們將為您提供專業(yè)解答。