FACS buffer溶液
簡(jiǎn)要描述:FACS buffer溶液用于流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞染色過(guò)程中細(xì)胞的洗滌及細(xì)胞濃度調(diào)節(jié),也可用于抗體的稀釋。主要成分為磷酸鹽緩沖液,疊氮鈉和牛血清白蛋白,BSA作為一種蛋白存在于緩沖液中可以減少抗體的非特異性結(jié)合,疊氮鈉可以維持細(xì)胞表面抗原的穩(wěn)定性。
詳細(xì)介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | CB004 |
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| 規(guī)格 | 500ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 | | |
FACS buffer溶液產(chǎn)品技術(shù)手冊(cè)
1. 產(chǎn)品概述
FACS 緩沖液 (Fluorescence-Activated Cell Sorting Buffer) 是一種專門為流式細(xì)胞術(shù)(FCM)設(shè)計(jì)的等滲染色與洗滌緩沖液。它以高品質(zhì)的磷酸鹽緩沖液(PBS)為基礎(chǔ),并科學(xué)添加了蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑及離子螯合劑。
本產(chǎn)品旨在為單細(xì)胞懸液提供穩(wěn)定的生理環(huán)境,在抗體孵育過(guò)程中有效封閉非特異性位點(diǎn),并防止細(xì)胞在離心和上機(jī)過(guò)程中的物理性聚集。本產(chǎn)品經(jīng)過(guò) 0.22 μm 微孔濾膜過(guò)濾,確保無(wú)微粒干擾,是免疫表型分析、細(xì)胞分選及各類流式檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)配伍試劑。
2. 作用機(jī)理
FACS 緩沖液通過(guò)其優(yōu)化的化學(xué)組分確保流式檢測(cè)的精準(zhǔn)度:
蛋白質(zhì)封閉與穩(wěn)定: 組分中的 BSA(牛血清白蛋白) 或 FBS(胎牛血清) 能有效占據(jù)細(xì)胞表面和管壁的非特異性結(jié)合位點(diǎn),顯著降低抗體背景染色,提高熒光信號(hào)的信噪比。
防止細(xì)胞結(jié)團(tuán): EDTA 作為高效的金屬離子螯合劑,通過(guò)去除環(huán)境中的鈣、鎂離子,抑制鈣粘蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞粘附,確保細(xì)胞以單細(xì)胞狀態(tài)通過(guò)流式儀噴嘴。
維持生理穩(wěn)態(tài): 精確的等滲環(huán)境與 pH 緩沖體系(7.2-7.4)可維持細(xì)胞膜完整性,防止細(xì)胞因滲透壓波動(dòng)而受損或自發(fā)熒光增強(qiáng)。
代謝抑制(可選): 部分配方含極微量NaN3,可抑制細(xì)胞代謝及受體下沉,鎖死細(xì)胞表面抗原狀態(tài)(注:活細(xì)胞分選用配方通常不含此組分)。
3. 產(chǎn)品核心優(yōu)勢(shì)
高信噪比: 優(yōu)化的蛋白封閉體系,大幅減少非特異性熒光背景,使弱陽(yáng)性群體界定更清晰。
抗聚集性能: 顯著減少細(xì)胞團(tuán)塊形成,防止流式儀管路堵塞,提高檢測(cè)效率與數(shù)據(jù)可靠性。
高純度無(wú)雜質(zhì): 嚴(yán)格除菌過(guò)濾,無(wú)肉眼不可見(jiàn)的細(xì)小顆粒,確保流式散點(diǎn)圖(FSC/SSC)基影潔凈。
兼容性廣: 適配于各類熒光偶聯(lián)抗體(如 FITC, PE, APC, Alexa Fluor 系列),不影響熒光淬滅或發(fā)射光譜。
極低內(nèi)毒素: 嚴(yán)格控制內(nèi)毒素水平,最大限度減少對(duì)敏感免疫細(xì)胞(如原代 T 細(xì)胞、DC 細(xì)胞)的非特異性激活。
4. 廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域
細(xì)胞表面染色: 免疫細(xì)胞亞群標(biāo)記、受體表達(dá)分析。
細(xì)胞洗滌與重懸: 離心后的細(xì)胞沉淀洗滌,以及上機(jī)前的最終樣本重懸。
細(xì)胞分選 (Sorting): 作為分選過(guò)程中的保護(hù)液,提高分選后細(xì)胞的成活率。
胞內(nèi)因子檢測(cè)預(yù)處理: 在固定透化前后的洗滌步驟,降低胞內(nèi)非特異性吸附。
5. 技術(shù)參數(shù)規(guī)格 (Specifications)
| 外觀 | 無(wú)色或微黃色透明液體 |
| 主要組分 | 特級(jí) PBS, 1-5% BSA/FBS, 2-5mM EDTA |
| pH 值 (25°C) | 7.2 - 7.4 |
| 滲透壓 | 280 - 320 mOsm/kg |
| 無(wú)菌處理 | 0.22 μm 濾膜過(guò)濾 |
| 內(nèi)毒素 | < 0.1 EU/mL |
| 儲(chǔ)存條件 | 4°C 避光保存 |
| 有效期 | 12 個(gè)月 |
6. 使用建議
上機(jī)前過(guò)濾: 對(duì)于極易結(jié)團(tuán)的組織來(lái)源細(xì)胞,建議在加入 FACS Buffer 后使用 40-70 μm 的細(xì)胞篩網(wǎng)過(guò)濾一次,以確保絕對(duì)的單細(xì)胞狀態(tài)。
溫度控制: 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中建議將 FACS Buffer 置于冰浴中,以降低細(xì)胞代謝,保持表面抗原的穩(wěn)定性。
活檢提醒: 若需進(jìn)行分選后的活細(xì)胞培養(yǎng),請(qǐng)選用不含NaN3(Azide-free)的定制版 FACS Buffer。
7. FACS buffer溶液質(zhì)量承諾
我們對(duì)每一批次的 FACS 緩沖液均進(jìn)行嚴(yán)格的 pH 值校驗(yàn)、滲透壓測(cè)試及流式上機(jī)背景背景檢測(cè)。我們承諾:產(chǎn)品純凈無(wú)顆粒,能顯著提升流式圖譜的分離度與美觀度,助力您的免疫學(xué)研究獲得發(fā)表級(jí)數(shù)據(jù)。如有任何技術(shù)疑問(wèn),我們將為您提供支持。
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