HEPES是一種優(yōu)良的兩性離子緩沖劑，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中。其有效緩沖范圍為pH 6.8–8.2，尤其在生理相關(guān)的pH 7.2–7.4范圍內(nèi)表現(xiàn)出較強(qiáng)的緩沖能力。一般使用終濃度為10–50 mM，通常在培養(yǎng)液中添加20 mM即可顯著增強(qiáng)緩沖穩(wěn)定性。HEPES的一個(gè)突出優(yōu)點(diǎn)是在開(kāi)放式培養(yǎng)或長(zhǎng)時(shí)間顯微觀(guān)察過(guò)程中，能夠有效抵消因CO?逸出導(dǎo)致的培養(yǎng)基堿化，從而維持pH的相對(duì)恒定，為細(xì)胞提供更穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境。因此，它特別適用于需要頻繁開(kāi)封或不在CO?控制條件下進(jìn)行的細(xì)胞操作。HEPES是很多細(xì)胞培養(yǎng)體系緩沖液的優(yōu)選，因?yàn)镠EPES對(duì)細(xì)胞膜無(wú)通透性，對(duì)各種生化反應(yīng)影響很小，化學(xué)和酶學(xué)穩(wěn)定，并且具有非常低的可見(jiàn)光和UV光吸收。